Diagnosticul molecular corespunde unui set de tehnici moleculare care urmăresc identificarea modificărilor ADN-ului care pot indica, de exemplu, bolile genetice sau cancerul. În plus, tehnicile moleculare sunt utilizate pe scară largă pentru identificarea și confirmarea bolilor infecțioase, deoarece reprezintă o metodă de diagnostic mai rapidă și mai precisă.
Diagnosticul molecular este scump și, prin urmare, nu este foarte frecvent solicitat de medici, totuși, acesta oferă rezultate precise cu privire la prezența modificării, modul în care aceasta poate interveni în funcționarea organismului și răspunsul pacientului la boală. tratament.
Ce este pentru asta
Diagnosticul molecular poate fi realizat cu mai multe obiective, principalele fiind:
- Identificarea mutațiilor legate de leucemie, cum ar fi identificarea translocării BCR-ABL, caracteristică leucemiei mieloide cronice (LMC);
- Mutațiile caracteristice bolilor hematologice, cum ar fi hemocromatoza ereditară, policitemia vera, trombocitmia esențială și trombofilia, de exemplu - înțelegeți ce este trombofilia și cum se face tratamentul;
- Modificările moleculare care indică apariția cancerului, cum ar fi cancerul colorectal, plămânul, sânul și creierul, de exemplu;
- Diagnosticul bolilor infecțioase, cum ar fi hepatita, uretrita, toxoplasmoza, leishmanioza etc., pe lângă identificarea virusului HPV .
Diagnosticul molecular, în ciuda faptului că este considerat costisitor în comparație cu alte tehnici de diagnosticare, este mai precis, deoarece este capabil să informeze despre modificarea asociată cu o anumită boală și despre gradul de influență al acestei modificări în organism, ajutând astfel tratamentul persoanei.
Pe lângă faptul că sunt utilizate pentru diagnosticarea diferitelor boli, tehnicile moleculare sunt, de asemenea, utilizate pentru a evalua răspunsul la tratament, în special la persoanele cu cancer, fiind una dintre cele mai eficiente metode de indicare a evoluției bolii și recăderii.
Cum se face
Diagnosticul molecular poate fi efectuat cu orice eșantion, iar medicul este rugat să furnizeze informații despre starea pacientului, care poate fi urină, saliva sau, de cele mai multe ori, sânge. Nu este necesar să se acorde rapid sau alte pregătiri pentru examinare.
Eșantionul este colectat și trimis la laborator împreună cu sfatul medicului care informează examenul sau tipul de cercetare care ar trebui făcută. Tehnica moleculară efectuată depinde de examinarea solicitată și implică o serie de proceduri precise, al căror scop final este de a identifica prezența sau absența modificărilor solicitate de medic.
De obicei, se utilizează doar o mică cantitate de probă, restul fiind depozitat astfel încât, dacă este necesar, testul să fie repetat.
Vedeți care sunt principalele tehnici moleculare
PCR
PCR, scurt pentru reacția în lanț a polimerazei, este o tehnică moleculară care constă în amplificarea unui fragment al materialului genetic, fie ADN sau ARN, cu scopul de a identifica mutații și, astfel, de a ajuta la diagnosticarea bolilor.
Această tehnică se face din extracția și purificarea materialului genetic, care este apoi plasat într-un amestec în care unul dintre componente este o enzimă de restricție care variază în funcție de examinarea solicitată și a cărei funcție este de a tăia materialul în fragmente pentru a identifica o posibilă schimbare genetică. Amestecul este plasat într-un termociclu, care este un aparat care acționează prin variația de temperatură indicată de către profesionist în funcție de examinare și, în acest fel, permite amplificarea fragmentului genetic. În cazul PCR convențional, după amplificare, produsul PCR este supus electroforezei, care este o tehnică moleculară bazată pe greutatea și mărimea fragmentelor, adică în funcție de aceste caracteristici se generează un model de benzi, analiza cărora se face bazată pe banda controlului pozitiv, adică în banda despre care se știe că corespunde modificării genetice.
PCR în timp real, denumit și qPCR, este un tip de PCR cantitativ, adică, pe lângă identificarea modificării genetice, este capabil să ofere informații despre expresia genelor, adică cât de mult este exprimată gena în organism, putând astfel fi utilizate pentru diagnosticarea și monitorizarea tratamentului. PCR în timp real nu necesită electroforeză, întregul proces de amplificare și analiză a materialului genetic este realizat de un aparat, iar rezultatul este interpretat de un specialist în domeniul sănătății.
secvențiere
Sequencingul este o tehnică moleculară care constă în determinarea secvenței de nucleotide a ADN-ului. Sequencing-ul apare dintr-o reacție asemănătoare PCR, totuși, în amestecul de amplificare, se adaugă nucleotide modificate prin adăugarea de fluorochromi, care, deoarece materialul este amplificat, nucleotidele modificate sunt încorporate în ADN și generează mai multe fragmente, corespund produsului secvențializării.
Produsul de reacție este plasat într-un aparat numit un secvențiator de ADN, în care, deoarece fragmentele sunt lovite de laserul aparatului, fluorochromii sunt excitați, emise fluorescență, ceea ce este indicat de aparat prin intermediul vârfurilor, fiecare vârf corespunzător la o nucleotidă. La sfârșitul reacției, echipamentul va informa secvența ADN, ajutând astfel medicul în diagnosticul bolilor genetice.
