Electroforeza este o tehnică de laborator realizată cu obiectivul de a separa moleculele în funcție de mărimea și sarcina electrică a acestora, astfel încât să poată fi pus diagnosticul bolilor, să se poată verifica expresia proteinelor sau să se identifice microorganismele.
Electroforeza este o procedură simplă și ieftină, fiind utilizată în rutine de laborator și în proiecte de cercetare. Conform scopului electroforezei, poate fi necesară efectuarea altor teste și examene pentru a ajunge la un diagnostic, de exemplu.
Pentru ce este
Electroforeza poate fi realizată în mai multe scopuri, atât în proiecte de cercetare, cât și în diagnostic, deoarece este o tehnică simplă și cu costuri reduse. Astfel, electroforeza poate fi efectuată pentru:
- Identificați viruși, ciuperci, bacterii și paraziți, această aplicație fiind mai frecventă în proiectele de cercetare;
- Test de paternitate;
- Verificați expresia proteinelor;
- Identificați mutațiile, fiind utile în diagnosticul leucemiilor, de exemplu;
- Analizați tipurile de hemoglobină circulantă, fiind util în diagnosticul anemiei falciforme;
- Evaluează cantitatea de proteine prezente în sânge.
Conform scopului electroforezei, poate fi necesară efectuarea altor teste complementare pentru ca medicul să poată finaliza diagnosticul.
Cum se face
Pentru a face electroforeza este necesar gelul, care poate fi poliacrilamidă sau agaroză în funcție de obiectiv, tampon de electroforeză și cuvă, marker de greutate moleculară și un colorant fluorescent, pe lângă un echipament cu lumină UV sau LED, cunoscut și sub numele de transiluminator.
După pregătirea gelului, trebuie pus un obiect specific pentru a face fântânile din gel, denumit popular pieptene, și lăsați gelul să se stabilească. Când gelul este gata, aplicați substanțele pe godeuri. Pentru aceasta, un marker de greutate moleculară trebuie plasat într-unul din puțuri, un control pozitiv, care este substanța care se știe ce este, un control negativ, care garantează validitatea reacției și probele care urmează să fie analizate. Toate probele trebuie amestecate cu un colorant fluorescent, deoarece astfel este posibilă vizualizarea benzilor de pe transiluminator.
Gelul cu probele trebuie plasat în cuva de electroforeză, care conține soluția tampon specifică, apoi dispozitivul este pornit astfel încât să existe curent electric și, în consecință, diferența de potențial, care este importantă pentru separarea particulelor în conformitate cu la sarcina și mărimea lor. Durata de funcționare electroforetică variază în funcție de scopul procedurii și poate dura până la 1 oră.
După timpul stabilit, este posibil să vizualizați rezultatul cursei electroforetice prin transiluminator. Când gelul este plasat sub lumină UV sau LED, este posibil să se vizualizeze modelul benzii: cu cât este mai mare molecula, cu atât migrează mai puțin, ajungând mai aproape de fântână, în timp ce cu cât molecula este mai ușoară, cu atât este mai mare potențialul migrator.
Pentru ca reacția să fie validată, este necesar ca benzile controlului pozitiv să fie vizualizate și ca în controlul negativ să nu se vizualizeze nimic, altfel este indicativ faptul că a existat contaminare și întregul proces trebuie repetat.
Tipuri de electroforeză
Electroforeza poate fi efectuată în diferite scopuri și, în funcție de scopul său, pot fi utilizate mai multe tipuri de gel, cele mai frecvente fiind poliacrilamida și agaroză.
Electroforeza pentru identificarea microorganismelor este mai frecventă în laboratoarele de cercetare, cu toate acestea, în scopuri de diagnostic, electroforeza poate fi utilizată pentru a identifica bolile hematologice și bolile care evoluează odată cu creșterea cantității de proteine, fiind principalele tipuri de electroforeză:
1. Electroforeza hemoglobinei
Electroforeza hemoglobinei este o tehnică de laborator efectuată pentru identificarea diferitelor tipuri de hemoglobină care circulă în sânge, făcând posibilă identificarea prezenței bolilor legate de sinteza hemoglobinei. Tipul de hemoglobină este identificat prin intermediul electroforezei la un pH specific, ideal între 8,0 și 9,0, verificându-se un model de benzi care poate fi comparat cu modelul normal, permițând identificarea prezenței hemoglobinelor anormale.
Pentru ce se face: electroforeza hemoglobinei se realizează pentru investigarea și diagnosticarea bolilor legate de sinteza hemoglobinei, cum ar fi anemia falciformă și boala hemoglobinei C, pe lângă faptul că sunt utile în diferențierea talasemiei. Aflați cum să interpretați electroforeza hemoglobinei.
2. Electroforeza proteinelor
Electroforeza proteinelor este un examen solicitat de medic pentru a evalua cantitatea de proteine care circulă în sânge și, astfel, pentru a identifica bolile. Acest test se face dintr-o probă de sânge, care este centrifugată pentru a obține plasma, partea din sânge constituită, printre alte substanțe, de proteine.
După electroforeză, se poate vizualiza un model de benzi și, ulterior, un grafic în care este indicată cantitatea fiecărei fracții de proteine, fiind fundamentală pentru diagnostic.
Pentru ce se face: Electroforeza proteinelor permite medicului să investigheze apariția mielomului multiplu, deshidratare, ciroză, inflamație, boli hepatice, pancreatită, lupus și hipertensiune arterială în funcție de modelul benzii și de graficul prezentat în raportul de examinare.
Înțelegeți cum se face și cum să înțelegeți rezultatul electroforezei proteinelor.
V-au fost utile aceste informații?
da nu
Parerea ta este importanta! Scrie aici cum ne putem îmbunătăți textul:
Alte intrebari? Faceți clic aici pentru a primi răspuns.
E-mail în care doriți să primiți un răspuns:
Verificați e-mailul de confirmare pe care vi l-am trimis.
Numele dumneavoastră:
Motivul vizitei:
--- Alegeți-vă motivul --- Boala Trăiți mai bine Ajutați o altă persoană Câștigați cunoștințe
Ești un profesionist din domeniul sănătății?
NuMedicianFarmaceutic Asistent medical NutriționistBiomedicalFizioterapeutFrumuset
Bibliografie
- BIOSFERA ENCICLOPEDIEI, CUNOAȘTERE CENTRUL ȘTIINȚIFIC. Electroforeză: concepte și aplicații. 2015. Disponibil la:. Accesat la 24 septembrie 2019
- KASVI. Ce este electroforeza și de ce este importantă?. Disponibil in: . Accesat la 24 septembrie 2019
